Análisis genético del activador transcripcional PerA durante la activación de los operones bfp y per en Escherichia coli enteropatógena

Abstract

"Esta investigación comprende la caracterización, en Escherichia coli Enteropatogena, de mutantes en el activador transcripcional PerA, que posiblemente participen en interacción con la RNA polimerasa; asi como, mutantes de las subunidades alfa y sigma de la RNA polimerasa, que intervengan en la interacción mencionada, durante la activación de los operones bfp y per. Se realizaron ensayos de actividad transcripcional, mediante el sistema indicador de la cloranfenicol acetil transferasa, para medir el nivel de expresión de los promotores bfpA y perA. Inicialmente en presencia de mutantes en PerA, se seleccionaron aquellas mutantes que redujeron considerablemente la expresión de uno o ambos promotores. Las mutantes seleccionadas se fusionaron a la proteína de unión a maltosa y se purificaron por cromatografía de afinidad, para examinar su capacidad de unión a las regiones reguladoras perA y bfpA mediante ensayos de cambio en la movilidad electroforética; demostrando que los residuos E116 y D168 muestran actividad diferencial durante la activación de los promotores bfpA y perA."