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Análisis genético del activador transcripcional PerA durante la activación de los operones bfp y per en Escherichia coli enteropatógena
(2015) García Zacarías, Claudia María; MARTINEZ LAGUNA, YGNACIO; 33726; PUENTE GARCIA, JOSE LUIS; 7470
"Esta investigación comprende la caracterización, en Escherichia coli Enteropatogena, de mutantes en el activador transcripcional PerA, que posiblemente participen en interacción con la RNA polimerasa; así como, mutantes de las subunidades alfa y sigma de la RNA polimerasa, que intervengan en la interacción mencionada, durante la activación de los operones bfp y per. Se realizaron ensayos de actividad transcripcional, mediante el sistema indicador del cloranfenicol acetil transferasa, para medir el nivel de expresión de los promotores bfpA y perA. Inicialmente en presencia de mutantes en PerA, se seleccionaron aquellas mutantes que redujeron considerablemente la expresión de uno o ambos promotores. Las mutantes seleccionadas se fusionaron a la proteína de unión a maltosa y se purificaron por cromatografía de afinidad, para examinar su capacidad de unión a las regiones reguladoras perA y bfpA mediante ensayos de cambio en la movilidad electroforética; demostrando que los residuos E116 y D168 muestran actividad diferencial durante la activación de los promotores bfpA y perA".