Browsing by Author "Molina Romero, Dalia"
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Tesis Diseño de inoculante de segunda generación tolerante a condiciones de desecación(Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, 2017-12) Molina Romero, Dalia; MOLINA ROMERO, DALIA; 43375; MUÑOZ ROJAS, JESUS; 89650; CASTAÑEDA LUCIO, MIGUEL; 21622Las bacterias que forman parte de la rizósfera y tienen la capacidad de generar un efecto benéfico sobre el crecimiento de las plantas son definidas como Rizobacterias Promotoras del Crecimiento Vegetal (PGPR por sus siglas en inglés) (Vacheron et al. 2013). Se ha documentado que las PGPR pueden beneficiar a las plantas a través de diversos mecanismos que favorecen a la planta de forma directa e indirecta, de acuerdo a esta característica se han clasificado a los mecanismos de promoción de crecimiento vegetal en dos grupos (Fibach-Paldi, Burdman, and Okon 2012; Rojas-Tapias et al. 2012): los que realizan un efecto benéfico directo y los que realizan un efecto indirecto. Las bacterias con mecanismos de efecto benéfico directo, proporcionan nutrientes en formas absorbibles. Por ejemplo las rizobacterias fitoestimuladoras proporcionan nutrientes como fosfatos y nitrógeno, mediante procesos como la fijación biológica de nitrógeno o la solubilización de fosfatos (Saleem et al. 2007).
Tesis de maestría Estudio de la regulación de la biosíntesis de PHB en Azospirillum brasilense Sp7(Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, 2005) Molina Romero, Dalia; Castañeda Lucio, Miguel; Martínez Morales, Luis JavierDebido a la gran versatilidad de aplicaciones de los plásticos son una parte importante en nuestra vida cotidiana; originalmente los plásticos se hicieron para ser resistentes a la degradación y a las condiciones ambientales, creando con esto un problema ambiental. Ante esta situación, se han realizado diversas investigaciones para poder sustituir este material por uno que presente las mismas propiedades pero que tenga un periodo de degradación más corto, provocando un menor daño ambiental. Los plásticos fabricados a partir de poli-ésteres bacterianos se presentan como una alternativa a esta problemática, ya que estos polímeros son biodegradables. Dentro de estos polímeros se encuentra el poli-ẞ-hidroxibutirato (PHB). La mayor limitante para el uso y comercialización de estos plásticos es su alto costo de producción, que es mucho mayor que el costo de producción de plásticos derivados del petróleo. Los esfuerzos realizados para contender con este problema son variados, entre ellos tenemos el uso de nuevos microorganismos, así como el uso de microorganismos modificados genéticamente. Azospirillum brasilense es una bacteria de vida libre que puede ser una buena alternativa para la producción de PHB. A. brasilense es un bacilo Gram negativo de suelo, acumula PHB en condiciones desfavorables de crecimiento, tal como limitación de oxígeno y una relación carbono/nitrógeno alta. Este microorganismo ha sido aislado de la superficie de la raíz de una amplia variedad de plantas (cereales como maíz, trigo, arroz, sorgo, avena y pastos forrajeros) y su rizósfera. En estas asociaciones cumple con la función de fijar nitrógeno atmosférico. El objetivo de este trabajo fue estudiar la regulación de la biosíntesis de PHB en 4. brasilense: así como determinar si existe relación entre la síntesis de PHB y la fijación de nitrógeno atmosférico en este microorganismo. En este estudio se decidió trabajar con el gen phbC, que codifica para la PHB síntasa, ya que esta documentado ampliamente el hecho de que este gen y su producto son puntos claves en la regulación de la producción del polímero. Para iniciar nuestro trabajo amplificamos por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) parte del gen phbC de la cepa Sp7, posteriormente se clonó el producto en el plásmido suicida pSUP202, para generar una fusión transcripcional phbC-lacz, después de corroborar la naturaleza del ADN clonado, seleccionamos un sitio de restricción único BamHI donde se ligó el cassette lacZ-Km. El plásmido recombinante se utilizó para generar una cepa (Sp749) con la fusión transcripcional cromosomal phbC-lacz, con la cual se pretendía determinar si existe regulación a nivel transcripcional, mediante cinéticas transcripcionales (cinéticas enzimáticas) de la fusión phbC-lacz (en dos medios con diferente taza carbono/nitrógeno: alta y baja), Sin embargo, nos percatamos que no era funcional la fusión transcripcional cromosomal phbC-lacZ, generada en el sitio BamHI correspondiente a la mutante Sp749; hipotetizamos que la falta de funcionalidad de la fusión, haya sido generada por la región donde se fusionó el cassette lacZ-Km. Este motivo, nos llevó al análisis de los dominios estructurales de la proteína PHB sintasa de A. brasilense; permitiéndonos visualizar la región de la proteína PHB sintasa en donde se generó la fusión, el sitio BamHI está localizado en un dominio hidrolasa (perteneciente a la familia de dominios lipasa) apoyando la hipótesis antes mencionada, en donde probablemente se esté generando fuerzas hidrofóbicas que impidan plegar adecuadamente a la proteína ẞ-galactosidasa. Este hecho nos impidió generar evidencias que demostraran la existencia de regulación transcripcional de la síntesis de PHB en A. brasilense. Se determinó la fijación de nitrógeno de la cepa silvestre Sp7 y de la cepa mutante Sp749, por el método de reducción de Acetileno (ARA). Encontrando una disminución dramática en la actividad de la nitrogenasa en la cepa mutante Sp749 en comparación a la cepa Sp7; evidenciando la interrelación de la síntesis de PHB y la fijación de nitrógeno.Memoria de congreso La interacción bioquímica entre bacterias y plantas(2023-03-04) Molina Romero, DaliaLas bacterias que se asocian a las plantas y generan efecto benéfico se designaron como Rizobacterias promotoras de crecimiento vegetal (PGPR por sus siglas en inglés), la interacción de las PGPR con las plantas se sustenta en una interacción bioquímica mediante la producción de metabolitos bacterianos que generan una respuesta en la planta. Esta interacción ha producido un incremento en el crecimiento vegetal, protección contra los fitopatógenos y provee la resistencia a la planta contra el estrés abiótico. Diversos géneros bacterianos forman parte de las PGPR, por ende, el perfil bioquímico es diverso, estos se han organizado como mecanismos de promoción del crecimiento vegetal directo e indirecto. En los mecanismos directos se ubican a la fijación biológica de nitrógeno, la solubilización de fosfatos, la producción de las fitohormonas y los sideróforos, en los mecanismos indirectos se incluyen producción de antibióticos, enzimas contra fitopatógenos, compuestos orgánicos volátiles (VOCs), ACC desaminasa, y la estimulación de la respuesta sistémica inducida (ISR) de la planta. El objetivo de esta presentación es mostrar como la actividad metabólica bacteria beneficia a las plantas con las que interacciona, y que esta interacción ofrece una aplicación biotecnológica para la actividad agrícola. El estudio de la inoculación bacteriana de las plantas genera conocimiento para la aplicación de las PGPR como biofertilizantes, ya sea como la inoculación de un solo género bacteriano o en consorcios, diversos trabajos mostraron como está interacción benéfica incrementa el crecimiento y la producción de las plantas. Además, de la opción de reducir el 50% de la aplicación de fertilizantes químicos como la urea y obtener una producción similar a la aplicación exclusiva de fertilizantes químicos a nivel de campo, mostrando a esta alternativa biotecnológica como una práctica agrícola amigable con el medio ambiente, y con una reducción en los costos de producción en la agricultura.