Browsing by Author "Pazos-Rojas, Laura Abisaí"
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Conferencia 27-07-2021 EL ESTADO VIABLE NO CULTIVABLE (VBNC) EN PSEUDOMONAS PUTIDA KT2440, UNA ESTRATEGIA PARA ENFRENTAR LA DESECACIÓN(2021-07-27) Pazos-Rojas, Laura AbisaíEl suelo es un ambiente heterogéneo altamente complejo en el que se llevan a cabo procesos físicos, químicos y biológicos, siendo uno de los mayores reservorios de la biodiversidad microbiana y constituyendo un importante recurso para la explotación biotecnológica [1]. Tomando en consideración las potencialidades agrobiotecnológicas de las bacterias, se han aplicado en cultivos de interés agrícola para aumentar su productividad [2,3], así como, disminuir el uso desmedido de fertilizantes minerales y productos químicos, que favorezcan la reducción de la contaminación en el planeta [4]. El potencial de Pseudomonas putida KT2440 para actuar como un promotor del crecimiento de plantas o como un biorremediador de compuestos tóxicos puede verse afectado por la desecación. En el presente trabajo, se evaluó la tasa de supervivencia bacteriana (BSR) de P. putida KT2440 bajo estrés por desecación en presencia de diferentes protectores. El kit LIVE/DEAD mostró que las bacterias protegidas mantuvieron un mayor número de células verdes después de la desecación, mientras que células sin protección se observaron de color rojo, indicando daño en la membrana. Sin embargo, cuando las bacterias no protegidas sometidas a 18 días de desecación se rehidrataron por un corto tiempo con exudados rizosfericos de maíz o por 48 h con agua (rehidratación prolongada), el número de bacterias fue tan elevado como en células sin estrés, sugiriendo que las células entraron en estado viable no cultivable (VBNC) bajo estrés por desecación y regresaron al estado cultivable después de la rehidratación. Se determinó la actividad celular en el estado VBNC analizando la expresión de los genes que codifican para el 16S rRNA, rpoN (housekeeping), mutL, mutS (proteínas del sistema mismatch de reparación de DNA) y oprH (proteína de membrana externa) mediante RT-PCR, observando que todos los genes se expresaron en células cultivables y no cultivables, indicando procesos moleculares activos durante el estado VBNC [5].Artículo Actividades de la APCM en 2022 y visibilidad de sus conferencias; un quehacer que tiene que ser reforzado(2022-01-13) Bustillos-Cristales, María del Rocío; Pazos-Rojas, Laura Abisaí; Muñoz-Rojas, Jesús; Morales-García, Yolanda ElizabethLa divulgación del conocimiento es imperante para el crecimiento de una sociedad y es uno de los compromisos que tiene la Asociación Poblana de Ciencias Microbiológicas. En este artículo editorial se hace un análisis del número de lecturas, visualización de conferencias y descargas de los archivos PDF de las charlas 2022. Se observa que, aunque hay un consumo adecuado del material publicado, es importante hacer más trabajo de difusión de las publicaciones con el fin de tener un mayor impacto en nuestra población de habla hispana. Además, en este trabajo se muestran otras actividades que ha tenido la APCM a lo largo del año 2022.Artículo Aislamiento de microorganismos a partir de plantas: más allá del cultivo convencional(Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, 2024-12-31) Morales-Barrón, Bruce Manuel; Baez, Antonino; Pazos-Rojas, Laura Abisaí; Aguirre Schilder, Kelsey; Muñoz-Rojas, Jesús; Morales-García, Yolanda ElizabethEl presente artículo aborda la compleja diversidad microbiana en las plantas, explorando las dificultades asociadas con el cultivo de la mayoría de los microorganismos. Aunque los estudios han revelado nuevos microorganismos, se destaca que los cultivables representan una fracción mínima de la diversidad total. Se proponen diversas explicaciones, incluyendo preferencias nutricionales en los medios de cultivo, microorganismos en estado no cultivable, producción de sustancias inhibitorias y dependencia de metabolitos. Se destaca el cambio de paradigma con el advenimiento de estudios de microbiomas, permitiendo la comprensión de la composición microbiana sin necesidad de cultivo. Se enfatiza que, a diferencia de la aplicación exitosa en microbiomas intestinales, la aplicación práctica en agricultura aún enfrenta desafíos. Se aboga por un conocimiento exhaustivo de los microbiomas vegetales, incluyendo microorganismos no cultivables, y se destaca la importancia de diseñar formulaciones microbianas adaptadas a la agricultura. En última instancia, es importante señalar la necesidad de superar las limitaciones del cultivo tradicional para avanzar en la comprensión y aplicación de los microbiomas en el ámbito agrícola.Artículo Diseño de un plásmido capaz de expresar la β-fructosidasa (invertasa) en una biofábrica de origen bacteriano(2022-05-09) Basulto-Moctezuma, Regina; Reyes-Mendez, Jorayma; Villegas-Moncayo, Daniela; Cuellar-Sánchez, Alma; Cruz-Solís, Irma; Gómez-Sánchez, Carlos Eduardo; Rivera-Urbalejo, América; Pazos-Rojas, Laura AbisaíLa tecnología del ADN recombinante ha permitido desarrollar la capacidad de clonar y expresar en un hospedero un gen ajeno a él, con la finalidad de aumentar la producción de proteínas recombinantes a un menor costo. En los últimos años, las aplicaciones de las enzimas tipo invertasas han sido exploradas en el sector farmacéutico, alimentario e incluso, agropecuario, debido a su capacidad de catalizar la hidrólisis de sacarosa para la síntesis de oligosacáridos. En la presente investigación se diseñó un plásmido capaz de expresar β-fructosidasa (BfrA) del microorganismo extremófilo Thermotoga marítima, proponiendo a Escherichia coli M15 como biofábrica para la expresión y producción de BfrA en la industria de fructooligosacáridos. El diseño del vector consideró la necesidad de una resistencia a antibióticos para las células transformadas, proponiendo el uso de cloranfenicol y ampicilina. Así como la inclusión de una cola de histidinas, que facilite la purificación de la proteína BfrA sintetizada por E. coli M15 mediante cromatografía de afinidad con un metal inmovilizado (IMAC). El vector seleccionado tiene un sitio de clonación múltiple para facilitar la ligación del gen bfrA y el gen reportero gfp como indicador del éxito de la ligación y la síntesis in vivo de la proteína BfrA. El plásmido propuesto ofrece la ventaja de tener una inducción controlada por lactosa pudiendo ser expresado en una bacteria de fácil y rápido crecimiento, lo que representará un menor costo en la síntesis de BfrA a nivel industrial, teniendo la oportunidad de aprovechar al máximo su uso en la producción, por ejemplo, de jarabes de azúcar con alto contenido de fructosa y fructoligosacáridos con propiedades medicinales para personas con diabetes.Conferencia Síntesis de proteínas: entendiendo la importancia del ribosoma y la función del RNA(2021-11-23) Pazos-Rojas, Laura AbisaíEn la década de los 50 quedó claro que existía un código genético que debía usarse para traducir una secuencia de nucleótidos a una secuencia de aminoácidos. En 1955, Francis Crick propone el primer paso: la fijación de un aminoácido a un ARN adaptador pequeño, conocido como ARN de transferencia. Con el descubrimiento de los ribosomas [1, 2] y el resto de componentes esenciales de la maquinaria de traducción, investigadores de varios laboratorios demostraron que el ARN mensajero es uno de los intermediarios clave en el flujo de información del ADN a la proteína y los ARN de transferencia son los intérpretes del código genético. Este tipo de ARN se considera el eslabón más importante entre la secuencia de nucleótidos del ARNm y la secuencia de aminoácidos en un polipéptido. En la síntesis proteica se requieren cuatro componentes que deben ensamblarse para formar un complejo de traducción: a) el ribosoma, que cataliza la formación de enlaces peptídicos, b) factores accesorios de naturaleza proteica, que ayudan al ribosoma en cada paso del proceso, c) ARNm, que lleva la información específica de la secuencia de la proteína, y d) aminoacil-ARNt que transporta a los aminoácidos activados. Todos estos factores se unen para realizar el ciclo de la traducción en tres pasos: iniciación, elongación o alargamiento y terminación [3]. Cada uno de estos ciclos puede repetirse de acuerdo a las necesidades de la célula y con ciertas diferencias entre procariotas y eucariotas [4, 5] principalmente en las proteínas que intervienen al inicio del ciclo y los factores de liberación al término de la síntesis de proteínas y desensamble del ribosoma.