BUAP Repository :: Browsing by Author "Romero Mastranzo, Esli"

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Diseño y construcción de vectores de expresión genética para plantas
(2020-08) Romero Mastranzo, Esli; CONTRERAS PAREDES, CARLOS ALBERTO; 176906; GANDARA ZAMORANO, ETELVINA; 131205
“La clonación de genes dentro de vectores plasmídicos es de gran importancia para el estudio de su función. A pesar de existir una gran variedad de variedad de vectores plasmídicos que son ampliamente utilizados para la investigación o en la industria, no siempre se encuentran al alcance de toda la comunidad científica o los costos de los insumos para emplearlos pueden ser elevados, lo que representa una limitante en el desarrollo fluido de la tecnología. En este trabajo se aborda la modificación del vector de clonación Gateway pEarleyGate101 para la expresión de proteínas recombinantes en plantas mediante el uso de enzimas de restricción y ligasas. Las modificaciones que se realizaron fueron: 1) La supresión de la región Gateway del que contiene el gen de toxicidad ccdB para 2) poder propagar el plásmido en Escherichia coli DH5α, 3) la inserción del gen reportero mCherry, 4) el cambio de resistencia al antibiótico kanamicina por espectinomicina, estas modificaciones permitieron generar 4 nuevos plásmidos: pEG-s/ccdB, pEG-s/ccdB-spec, pEG-s/ccdB-mCherry y pEG-s/ccdB- mCherry-spec.”