Identificación de la transferencia de genes y proteínas mediada por OMV'S purificadas de Klebsiella pneumoniae
Date
2024-04
Authors
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Publisher
Benemérita Universidad Autónoma de Puebla
Abstract
"Klebsiella pneumoniae, una bacteria oportunista Gram-negativa, es objeto de numerosos estudios clínicos debido a su capacidad para causar diversas infecciones y su rápida adquisición de resistencia a antimicrobianos. Las microvesículas de membrana externa (OMV's), estructuras esféricas de tamaño nanométrico secretadas por bacterias Gram-negativas, han despertado interés por su capacidad para transportar biomoléculas, como proteínas y ácidos nucleicos. En este estudio, se busca comprender la importancia de las OMV's en el transporte de genes de resistencia a cepas susceptibles. Para lograr este objetivo, se indujo la sobreexpresión de las OMV's mediante estrés con antibiótico, seguido de su purificación mediante centrifugación diferencial y filtración. Se llevaron a cabo tratamientos con DNasa y Proteinasa K para detectar la presencia de DNA y proteínas externas, respectivamente. Posteriormente, se realizaron ensayos de protección mediados por OMV's en una cepa susceptible a antibióticos, seguidos de pruebas con antibiogramas para determinar la transferencia de resistencia a la bacteria susceptible. Además, se llevaron a cabo ensayos de inmunofluorescencia indirecta para confirmar la presencia de proteínas externas. Finalmente, se amplificaron los genes codificantes para resistencia a beta-lactámicos en K. pneumoniae".
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