Desarrollo de un sistema heterólogo para generación de un antígeno de la proteína TbpB de Avibacterium paragallinarum
Date
2014
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“La coriza infecciosa es una enfermedad de las vías respiratorias de los pollos que se caracteriza por flujo nasal y tumefacción de la cara. Esta enfermedad es provocada por Avibacterium paragallinarum y es causa de grandes pérdidas económicas. Para controlar la coriza infecciosa se han desarrollado diversas bacterinas, aunque no han logrado tener todo el éxito deseado. Además de las bacterinas, algunas vacunas a base de proteínas extracelulares han mostrado tener altas propiedades antigénicas. Entre estas, TbpB una proteína de unión a hierro, ha resultado ser muy inmunogénica.
A partir de la cepa 0083 de Avpg se extrajo ADN genómico y se amplificó el gen tbpB. Los diferentes productos de amplificación de este gen, se ligaron al vector pBluescript KS(-) y se usaron para transformar a Escherichia coli DH5α. A las células transformantes se les indujo la síntesis del péptido clonado utilizando IPTG y 2,2 dipiridil. Se hizo una extracción de proteínas totales y se separaron en geles desnaturalizantes del tipo SDS-PAGE para comparar el patrón de bandas de proteínas de las clonas transformantes con el control negativo (DH5α KS(-) sin insertos)”.
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