Síntesis química y predicción de estructura secundaria de Cn29, un péptido aislado del veneno del alacrán Centruroides noxius
Date
2019-03
Authors
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Publisher
Benemérita Universidad Autónoma de Puebla
Abstract
“El veneno de los escorpiones está compuesto principalmente de péptidos responsables de la actividad tóxica y proteínas con diversas actividades enzimáticas. Estos péptidos, se han empleado como herramientas farmacológicas en el estudio de canales iónicos, y alguno de ellos se han considerado como candidatos para el desarrollo de agentes terapéuticos. El objetivo principal de este trabajo fue la síntesis química de un péptido aislado del veneno del escorpión Centruroides noxius, nombrado Cn29, de 27 residuos de aminoácidos, 6 correspondientes a Cisteína, que forman 3 enlaces disulfuro, y masa molecular de 2,821.25 Da. La síntesis se realizó mediante la metodología síntesis de péptidos en fase solida F-moc. Después de obtener el péptido crudo, se realizó el plegamiento in vitro, y se purificó por cromatografía liquida de alta eficacia fase reversa, la masa molecular fue comprobada por espectrometría de masas por electrospray. La identidad estructural del péptido sintético con el nativo se comprobó mediante una prueba de co-elución. Para determinar los enlaces disulfuro, Cn29 se digirió con Tripsina y Termolisina, los fragmentos resultantes se analizaron por secuencia de aminoácidos por degradación de Edman y espectrometría de masas, determinando un patrón de enlaces: Cys1-Cys5, Cys2-4, Cys3-Cys6. Finalmente se realizó una predicción in silico de estructura secundaria, accesibilidad al solvente y estructura terciaria por medio del servidor I-TASSER “.
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