Sobreproducción de la proteína viral HN-RVP en la levadura Schizosaccharomyces pombe
Date
2015-06
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“El virus del Rubulavirus porcino (RVP) es el responsable de la enfermedad de los ojos azules, causando un cuadro respiratorio severo junto a meningoencefalitis en cerdos lactantes y alteraciones reproductivas en adultos, por lo que produce pérdidas importantes en la industria pecuaria del país. La HemaglutininaNeuraminidasa (HN) es una glicoproteína de membrana involucrada en el inicio de la infección, destacando por ser la más inmunogénica. Las proteínas recombinantes de sistemas de expresión como las levaduras, son una excelente opción para producir diversas proteínas, por lo que siendo la HN la proteína más inmunogénica del RVP, representa ser la mejor candidata para la elaboración de un recurso preventivo como vacuna recombinante. Schizosaccharomyces pombe ha mostrado ser un sistema de expresión eficiente para la producción de proteínas heterólogas por generar modificaciones post-transcripcionales parecidas a organismos superiores. El objetivo del presente trabajo fue obtener cepas de S. pombe productoras de la HN recombinante de RVP. Se obtuvo por PCR el marco de lectura abierto (ORF) del ectodominio de la HN (eHN) de la cepa PAC1 del RVP usando como plantilla el vector pPIC2αB-HN. El fragmento de PCR se resguardó en un vector obteniendo así el pJET-HNhm. Posteriormente se construyó el vector para levadura”.
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