Técnicas de detección de moléculas contaminantes en preparaciones proteicas purificadas de Salmonella spp.
Date
2025-06
Authors
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Publisher
Benemérita Universidad Autónoma de Puebla
Abstract
"La salmonelosis es actualmente una de las principales zoonosis en varios países, causada por el consumo de alimentos o agua contaminados con Salmonella typhi. En humanos, provoca fiebre, dolor de cabeza y diarrea, y si no se trata adecuadamente, puede derivar en choque séptico y muerte. En este estudio se realizaron tres extracciones de proteínas usando distintos buffers de lisis con concentraciones de SDS al 0.02, 0.05 y 0.07 %. Los extractos fueron purificados mediante FPLC modificando la concentración de NaCl (75, 100, 150 mM), obteniéndose tres preparaciones proteicas purificadas a homogeneidad, y mediante electroforesis se detectó la proteína de interés de 38 kDa. El objetivo fue detectar moléculas contaminantes en estas preparaciones y cuantificarlas mediante métodos espectrofotométricos: SDS, carbohidratos, lípidos, endotoxina y RNA. Se concluye que MP3 presentó mayor concentración de proteína (0.165 mg/mL) y menor concentración de contaminantes (SDS 2544.067 µg/mL, ARN 0.0404 mg/mL, LPS 56 EU/mL), mientras que MP1 tuvo menor concentración de carbohidratos (0.318 µg/mL). Estas diferencias se atribuyen a las variaciones en los métodos de extracción y purificación. La cuantificación de lípidos no fue precisa, posiblemente por interferencia entre SDS y el reactivo SPV".
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